中国临床药学杂志

2010, v.19(03) 145-148

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HPLC法测定人肝微粒体6β-羟基睾酮和1-羟基咪达唑仑浓度
Determination of 6β-hydroxytestosterone and 1-hydroxymidazolam in human liver microsomes by HPLC

裘福荣;张荣;孙建国;王广基;蒋健;马越鸣;

摘要(Abstract):

目的建立和验证人肝微粒体中CYP3A4探药代谢物6β-羟基睾酮和1-羟基咪达唑仑的测定方法 ,以准确体外评价CYP3A4的活性。方法在人肝微粒体温孵系统中加入睾酮37℃温孵生成6β-羟基睾酮,经过碱化后用乙酸乙酯提取微粒体样本,采用Phenomenex Gemina C_(18)分离,流动相由甲醇和水组成,梯度洗脱,流速1.0 mL·min~(-1),检测波长245 hm,测定微粒体中6β-羟基睾酮浓度;或人肝微粒体温孵系统中加入咪达唑仑,37℃温孵生成1-羟基咪达唑仑,经过乙腈处理人肝微粒体样本,采用Diamosil C_(18)分离,20 mmoL·L~(-1)醋酸铵-乙腈(60:40,V/V)流动相等度洗脱,流速1.0mL·min~(-1),检测波长254 nm,测定1-羟基咪达唑仑浓度。结果 6β-羟基睾酮线性范围为0.111~8.90 mg·L~(-1),1-羟基咪达唑仑线性范围为20~1 000 mg·L~(-1),两代谢物的批内、批间差异<15%,准确度为85%~115%。结论建立的测定微粒体中6β-羟基睾酮和1-羟基咪达唑仑浓度的方法符合生物样品测定的要求,能准确测定微粒体中目标物浓度,可用于评价CYP3A4的活性。

关键词(KeyWords): 人肝微粒体;6β-羟基睾酮;1-羟基咪达唑仑;高效液相色谱

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 上海卫生局局级课题(编号049);; 国家自然科研基金(编号30630076);; 上海市教委重点学科中药临床药理学(编号J50303);; 临床药理学科研共享平台(编号SHDC12007202)

作者(Author): 裘福荣;张荣;孙建国;王广基;蒋健;马越鸣;

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DOI: 10.19577/j.cnki.issn10074406.2010.03.003

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